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產(chǎn)品名稱:

禽流感H5亞型抗體ELISA檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品型號(hào): 產(chǎn)品時(shí)間: 2023-03-08
禽流感又名真性雞瘟或歐洲雞瘟,是由A型禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)引起的禽類的一種急性、高度致死性傳染病,以急性敗血性死亡到無(wú)癥狀帶毒為特征。
禽流感H5亞型抗體ELISA檢測(cè)試劑盒用于檢測(cè)禽類血清中禽流感H5病毒抗體,可用于免疫效果評(píng)價(jià)、輔助診斷等。

產(chǎn)品概述

禽流感H5亞型抗體ELISA檢測(cè)試劑盒

使用說(shuō)明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名:禽流感H5病毒IgG抗體檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)

英文名:Diagnostic Kit for Antibodies to Avian Influenza H5 Virus (ELISA)

【包裝規(guī)格】 96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

【預(yù)期用途】 禽流感又名真性雞瘟或歐洲雞瘟,是由A型禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)引起的禽類的一種急性、高度致死性傳染病,以急性敗血性死亡到無(wú)癥狀帶毒為特征。

本試劑用于檢測(cè)禽類血清中禽流感H5病毒抗體,可用于免疫效果評(píng)價(jià)、輔助診斷等。

【原    理】

    本試劑盒由預(yù)包被禽流感H5病毒抗原的酶標(biāo)板、抗體工作液、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫法原理檢測(cè)禽血清或血漿中禽流感H5病毒抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入稀釋的待檢血清和抗體工作液,若樣品中含有禽流感H5病毒抗體則將阻斷抗體工作液與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,從而使后續(xù)反應(yīng)不出現(xiàn)顯色;反之則出現(xiàn)顯色;顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成負(fù)相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有禽流感病毒抗體。

【試劑盒組成】

序號(hào)

名稱

規(guī)格/96T×1

規(guī)格/96T×2

規(guī)格/96T×5

1

酶標(biāo)記物

11ml×1(紅蓋)

11ml×2(紅蓋)

26ml×2(紅蓋)

2

抗體工作液

6ml×1(藍(lán)蓋)

11ml×1(藍(lán)蓋)

26ml×1(藍(lán)蓋)

3

20X濃縮洗滌液

40ml×1(白蓋)

40ml×1(白蓋)

200ml×1(白蓋)

4

底物液A

6ml×1(白蓋)

11ml×1(白蓋)

26ml×1(白蓋)

5

底物液B

6ml×1(黑蓋)

11ml×1(棕蓋)

26ml×1(黑蓋)

6

終止液

6ml×1(黃蓋)

11ml×1(黃蓋)

26ml×1(黃蓋)

7

陽(yáng)性對(duì)照

1.0 ml×1(紅蓋)

1.5 ml×1(紅蓋)

2.0 ml×1(紅蓋)

8

陰性對(duì)照

1.0 ml×1(綠蓋)

1.5 ml×1(綠蓋)

2.0 ml×1(綠蓋)

9

酶標(biāo)板

96T×1

96T×2

96T×5

10

蓋板膜

1

2

5

11

自封袋

1

1

2

12

說(shuō)明書

1

1

1

 

【儲(chǔ)存及有效期】 2~8℃保存,有效期12個(gè)月。

包被板開封后請(qǐng)于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個(gè)月。

【適用儀器】 含450nm、630nm波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀,37℃恒溫設(shè)備,可調(diào)微量移液器。

【樣品準(zhǔn)備】

  1. 血清/血漿:取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清或血漿,要求血清/血漿清亮,無(wú)溶血、無(wú)污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,長(zhǎng)期需置-20℃保存。

      蛋黃:取2ml新鮮蛋黃加2ml生理鹽水震蕩混勻,3000轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘,取上清作為樣本。

  1. 待檢血清、血漿或已處理蛋黃樣本恢復(fù)室溫、混勻待用。陰、陽(yáng)性對(duì)照不用稀釋。
  2. 濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水+1份濃縮洗滌液)。

【檢驗(yàn)方法】

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。

2.取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)陰性/陽(yáng)性對(duì)照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。

3.陰、陽(yáng)性對(duì)照孔分別加入陰、陽(yáng)性對(duì)照50μl;樣品孔每孔先加入40μl工作洗滌液,再加入10μl待檢樣本(稀釋比例為1:5)。

4.每孔加抗體工作液50μl,混勻,蓋好蓋板膜,置37℃(推薦水?。┍芄夥磻?yīng)30分鐘。

5.甩去孔內(nèi)液體,每孔加350 ul工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,后一次拍干。

6.每孔加酶標(biāo)記物100μl,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應(yīng)30分鐘。

7.洗滌,同步驟5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應(yīng)15分鐘。

9.每孔加終止液50μl,混勻,于450nm(可用630nm作參比波長(zhǎng))測(cè)定各孔吸光值(A值)。。

【參考值】 實(shí)驗(yàn)正常的情況下,陰性對(duì)照吸光值≥1.0,陽(yáng)性對(duì)照吸光值≤陰性對(duì)照吸光值×50%。

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

1.PI=(1-樣本值/陰性對(duì)照孔均值)×100%;

2.未曾免疫雞群:PI≥50為陽(yáng)性;PI<50為陰性。

3.免疫雞群:監(jiān)測(cè)并記錄樣本當(dāng)時(shí)的抗體水平,根據(jù)結(jié)果分析抗體水平的分布及雞群免疫狀態(tài)的動(dòng)向。

【試驗(yàn)方法的局限性】

    該試驗(yàn)僅作為定性檢測(cè)禽流感H5病毒抗體,根據(jù)PI值高低可作抗體水平強(qiáng)、中、弱的粗略評(píng)估。

【注意事項(xiàng)】

1.實(shí)驗(yàn)操作時(shí)需戴手套、穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實(shí)驗(yàn)廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請(qǐng)立即用大量自來(lái)水沖洗。

3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存。

4.濃縮洗滌液在低溫時(shí)容易結(jié)晶,使用時(shí)需恢復(fù)至室溫以*溶解。

5.洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。

6.用于檢測(cè)的樣品應(yīng)保持新鮮。

7.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。

8.禽流感H5亞型抗體ELISA檢測(cè)試劑盒不同批號(hào)試劑組分不得混用。

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